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液相色譜知識

c18色譜柱沖洗方法

2023-08-17 Vink

在使用C18色譜柱進(jìn)行分析后,為了保護(hù)色譜柱和清洗殘留的化合物,可以進(jìn)行沖洗步驟。下面是常見的C18色譜柱沖洗方法:


1. 洗脫劑法:使用有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈等作為洗脫劑,可以迅速將柱內(nèi)殘留的化合物洗出。常見的洗脫劑用法是將有機(jī)溶劑與流動(dòng)相以一定的比例混合,例如80%甲醇/20%水。將洗脫劑以較高流速(例如1-2 mL/min)通過色譜柱沖洗,通常持續(xù)沖洗10-20分鐘。


2. 稀酸法:在某些情況下,使用稀酸溶液(如0.1%三氟乙酸)可以更徹底地清洗色譜柱。將稀酸溶液以較高流速通過色譜柱,持續(xù)沖洗10-20分鐘。


在進(jìn)行沖洗時(shí),建議將流動(dòng)相流速稍微增加,但不要超過色譜柱的最大允許流速。此外,如果需要更徹底地清洗色譜柱,可以進(jìn)行多次沖洗。


最后,注意沖洗后,應(yīng)將色譜柱再次平衡至分析條件的初始條件,以確保下一次分析的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。